常用人肝癌細(xì)胞系

1.SMMC-7721 人肝癌細(xì)胞株

SMMC-7721細(xì)胞系是于1977年建立，材料取自一名50歲男性原發(fā)性肝細(xì)胞癌HCC患者的手術(shù)切除標(biāo)本進(jìn)行體外培養(yǎng)而得。其生物學(xué)特性如下：細(xì)胞系生長(zhǎng)較迅速穩(wěn)定，在原代細(xì)胞開始傳代階段增殖緩慢，以后趨于穩(wěn)定而迅速生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞的亞微結(jié)構(gòu)形態(tài)符合癌細(xì)胞的一般特征，甲胎蛋白（a-fetoprotein, AFP）免疫熒光染色呈陽性；LDH同工酶譜的變化與肝癌細(xì)胞的一般特征一致；免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤率高，動(dòng)物異種后瘤結(jié)節(jié)經(jīng)病理切片檢查，其組織形態(tài)和原手術(shù)切除標(biāo)本類似。

2.Bel-7402 人肝癌細(xì)胞株

Bel-7402于1974年建立，來源于一位53歲男性肝癌患者的手術(shù)切除標(biāo)木，屬于HCC。生物學(xué)特性如下：細(xì)胞增長(zhǎng)迅速而恒定，6-7 d可傳代1次，細(xì)胞形態(tài)以多邊形，上皮樣占絕大多數(shù)，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞染色體中有一大而長(zhǎng)的近端著絲點(diǎn)染色體，出現(xiàn)頻率高，是本株細(xì)胞的標(biāo)記染色體；AFP免疫熒光反應(yīng)陽性；LDH、 G6PD、TAT等酶代謝及細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)基本上保持臨床人體肝癌的特性；異種接種后成瘤率高，3-4d 可成瘤，瘤塊組織學(xué)病理與臨床HCC相近。

3.MHCC97 人肝癌細(xì)胞株

MHCC97細(xì)胞系由上海醫(yī)科大學(xué)中山醫(yī)院建立，將一名我國(guó)39歲男性HCC患者的肝右葉轉(zhuǎn)移病灶的手術(shù)切除標(biāo)本接種于裸鼠肝內(nèi)建造出人肝癌裸鼠轉(zhuǎn)移模型（LCI-D20）而得。已證實(shí)，經(jīng)過再次分離得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM3 3種細(xì)胞株，依據(jù)它們的轉(zhuǎn)移特點(diǎn)，雖來源同一父系，但具有異質(zhì)性，即具有不同的轉(zhuǎn)移潛能。

MHCC97人肝癌細(xì)胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉(zhuǎn)移模型（LCI-D20）體外傳代培養(yǎng)獲得，該細(xì)胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學(xué)和遺傳學(xué)特征，細(xì)胞呈上皮樣，貼壁生長(zhǎng)，血清HBsAg、AFP高表達(dá)，成瘤率高且優(yōu)先轉(zhuǎn)移的靶器官是肺，肺轉(zhuǎn)移率100%，故證實(shí)該細(xì)胞系為高轉(zhuǎn)移特性的人肝癌細(xì)胞系。

2001年，研究者從MHCC97細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)并分離出不同轉(zhuǎn)移潛能的2個(gè)細(xì)胞系MHCC97-H和MHCC97-L，前者肺轉(zhuǎn)移率100%，后者40%；從生長(zhǎng)速度上，前者細(xì)胞倍增時(shí)間較后者短；穿透人工基底膜能力前者較后者大；前者均較后者活 力強(qiáng)、代謝旺。傳代至20代后，兩種形態(tài)學(xué)特征及生長(zhǎng)速度方面均較穩(wěn)定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉(zhuǎn)移潛能的HCCLM3細(xì)胞系。

4.HepG2人肝丹細(xì)胞瘤

1979年，從阿根廷一名15歲高加索男孩的原發(fā)性肝胚細(xì)胞瘤中分離出并建立，該細(xì)胞系呈上皮樣，貼壁抱團(tuán)生長(zhǎng)，生長(zhǎng)較快,傳代周期為1-2d， 低轉(zhuǎn)移，裸鼠中成瘤率較差，AFP 陽性， HBsAg陰性，然而目前尚未證明該細(xì)胞中有乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）基因組；但通過實(shí)驗(yàn)已證實(shí),該細(xì)胞系分化程度較高，細(xì)胞里代謝酶的生物轉(zhuǎn)化特性較完整，不需加入外源性活化系統(tǒng)。在藥物作用相關(guān)研究中代謝酶保持穩(wěn)定，不會(huì)因傳代次數(shù)增多而有所改變，所含有的生物轉(zhuǎn)化代謝酶與人正常肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞同源，因此，常被用于體外肝細(xì)胞代謝或遺傳毒性試驗(yàn)方面的理想細(xì)胞系。

其中，HepG2.2.15 是目前應(yīng)用較為廣泛的細(xì)胞株，它是HepG2的衍生物是體外篩選抗HBV藥物的良好模型，并用于抗HBV新藥開發(fā)的體外研究工具。

5.Hep3B人肝癌細(xì)胞株

Hep3B分離自8歲美國(guó)黑人男童的肝癌組織。細(xì)胞形態(tài)跟HepG2類似，呈上皮細(xì)胞，電鏡下觀察胞漿里面很多粗大的黑顆粒，同樣喜抱團(tuán)貼壁生長(zhǎng)，其在裸鼠中能致瘤，但基本不轉(zhuǎn)移。HBV陽性，這與HepG2不同，這株細(xì)胞整合了完整的HBV基因組，可用于HBV感染后發(fā)展致癌相關(guān)研究。

6.Huh-7人肝癌細(xì)胞株

Huh-7細(xì)胞系于1982年從一名患有肝癌的57歲日本男性肝癌組織標(biāo)本上培養(yǎng)而得。該細(xì)胞AFP陽性，高度分化，細(xì)胞呈上皮樣，貼壁生長(zhǎng)，特點(diǎn)是HBV陰性,而具有內(nèi)型肝炎病毒（hepatitis C  virus，HCV）易感性，故可用于HCV與肝癌的關(guān)系的研究。除了用于研究致癌性，還用于基因表達(dá)的調(diào)節(jié)機(jī)制、新陳代謝及VLDL的分泌等。此細(xì)胞系的特別之處如下：可用于生產(chǎn)重組蛋白如促紅細(xì)胞生成素；在蛋白質(zhì)生物學(xué)方面用于研究在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的登革病毒；廣泛用于異種移植動(dòng)物模型。

7.PLC/PRF/5 人肝癌亞歷山大細(xì)胞

PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細(xì)胞于1976 年建系，細(xì)胞來自一位患有原發(fā)性HCC的莫桑比克男性患者的標(biāo)本，為上皮樣貼壁生長(zhǎng)， AFP陽性，不產(chǎn)生白蛋白，分泌ad亞型的HBsAg而不產(chǎn)生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒，卻可維持HAV的繁殖，該細(xì)胞可能含有全部HBV基因組，同工酶譜及核型與人類同源；裸鼠異種移植可致瘤。此細(xì)胞系因其產(chǎn)生HBsAg的物理化學(xué)和免疫化學(xué)特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似，因此，可被用來研究HBV體外病毒及其與原發(fā)性肝癌的關(guān)聯(lián),抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及抗病的制備等方面。

人肝癌細(xì)胞系具有以下優(yōu)點(diǎn)

首先，在選擇實(shí)驗(yàn)對(duì)象的比較上，人肝癌細(xì)胞系相較于人原代肝細(xì)胞，克服了人原代肝細(xì)胞來源困難、實(shí)驗(yàn)難控制、存活時(shí)間短的局限，肝癌細(xì)胞系為已獲得的穩(wěn)定傳代的細(xì)胞，具有來源方便、操作簡(jiǎn)單、條件可控和可重復(fù)等優(yōu)點(diǎn)，是用于肝癌疾病相關(guān)研究的理想對(duì)象。

其次，肝癌細(xì)胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織，具有與肝癌患者體內(nèi)相似的遺傳基因組，其發(fā)生發(fā)展機(jī)制、功能蛋白表達(dá)、病毒復(fù)制能力、侵襲轉(zhuǎn)移功能及抗藥性等，具有與人類親源體極其相近的特點(diǎn)，因此更適合應(yīng)用于肝癌各領(lǐng)域的研究.

人肝癌細(xì)胞系選擇

那么人肝癌細(xì)胞株如何選擇呢？一方面你可以查找相關(guān)的文獻(xiàn)，另一方面可以考慮選擇幾株常用的肝癌細(xì)胞株，然后進(jìn)行驗(yàn)證，如WB、QPCR驗(yàn)證目標(biāo)基因的情況，從而選擇一株最佳的細(xì)胞來完成后期的研究。