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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  試劑盒  >  檢測(cè)試劑盒  >  TE0033(ACP)檢測(cè)試劑盒(PNP微板法)

(ACP)檢測(cè)試劑盒(PNP微板法)

簡(jiǎn)要描述:(ACP)檢測(cè)試劑盒(PNP微板法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):TE0033
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-11-01
  • 訪  問  量:201

詳細(xì)介紹

堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡(jiǎn)稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi),其活性所需最適pH 9.2~9

.8。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細(xì)胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛、肝的毛細(xì)膽管膜以及

微動(dòng)脈和毛細(xì)血管動(dòng)脈部之內(nèi)皮,還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮之溶酶體、中性粒細(xì)胞之中性顆粒以及

平滑肌的細(xì)胞膜。


(ACP)檢測(cè)試劑盒(PNP微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP比色法,其檢測(cè)原理是

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)為一種常用的磷酸酶顯色底物,在酸性條件下,可在堿性磷酸酶的作用下生成

p-nitrophenol;在堿性條件下p-nitrophenol轉(zhuǎn)變成醌式結(jié)構(gòu),呈較深的黃色,產(chǎn)物黃色越深說明堿性磷酸酶活性越高,

反之則酶活性越低,通過比色法(酶標(biāo)儀)測(cè)定400~415nm處吸光度,據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出堿性磷酸酶活性水平

,可用于檢測(cè)細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內(nèi)源性的堿性磷酸酶活性。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域

,不適用于臨床診斷或其他用途。


計(jì)算:堿性磷酸酶金氏活性單位的定義:在 37℃條件下,100ml 待測(cè)樣品與顯色底物(即 ALP

顯色液所含物質(zhì))作用 15min,產(chǎn)生 1mg 酚為一個(gè)金氏單位。

以系列 Phenol 標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號(hào))對(duì)應(yīng)的金氏單位(5、10、20、30、40、50U/L)為橫坐標(biāo),以相應(yīng)

的 A 標(biāo)準(zhǔn)(1~6 號(hào))為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以 A 測(cè)定-A 對(duì)照的差值為實(shí)際的吸光度,用

該差值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比,求出酶活力單位。

參考區(qū)間(37℃):

健康成年人 3~13 金氏單位

健康兒童 5~28 金氏單位

注意事項(xiàng):

1、待測(cè)樣品中不能含有磷酸酶抑制劑,同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2、如果沒有酶標(biāo)儀,也可以使用分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)注意 96 孔板最大檢測(cè)體積。

3、所測(cè)樣品的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限,應(yīng)稀釋樣品后重新測(cè)定。

4、空白孔如果顯紅色,說明 ALP 顯色液不可用,應(yīng)丟棄。

5、加入顯色基液時(shí)應(yīng)迅速,并且及時(shí)混勻,否則顯色不充分。

6、如無法檢測(cè) 510nm,亦可檢測(cè) 500~530nm 范圍內(nèi)吸光度。

7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

附錄:參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:測(cè)定 Phenol 標(biāo)準(zhǔn)在 5~50U/L 金氏單位時(shí),通過酶標(biāo)儀 505nm 測(cè)

定其吸光度多在 0.1~1.0 之間,標(biāo)準(zhǔn)曲線參考如下:


3.jpg


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